【佳学基因检测】乳腺癌抗药后基因检测

基因检测为什么要针对乳腺癌的抗药性？

人类表皮生长因子受体 2 (HER2)，又称 ErbB2 或 Neu，是由 ERBB2 (HER2) 基因编码的一种酪氨酸激酶受体蛋白。HER2 属于表皮生长因子受体 (EGFR) 家族，与 EGFR/HER1、ERBB3/HER3 和 ERBB4/HER4 同属。尽管 HER2 是唯一不与配体结合的成员，但它能形成异二聚体并表现出强的催化激酶活性，通过 PI3K 和 MAPK 信号通路有效触发下游信号传导。大约 15%–20% 的原发性乳腺癌表现为 HER2 蛋白过表达和/或 HER2 基因扩增，这与预后不良相关。开发结合 HER2 胞外结构域的人源化单克隆抗体（如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗）、EGFR-HER2 小分子激酶抑制剂（如拉帕替尼、来那替尼或图卡替尼）和抗体-药物偶联物（如 T-DM1 或 DS-8201）彻底改变了 HER2 阳性乳腺癌的治疗方式。然而，大多数转移性疾病患者最终会因新生或获得性耐药而导致抗 HER2 治疗失败，20%–30% 的早期 HER2+ 乳腺癌患者会复发。因此，阐明抗 HER2 药物耐药机制对于进一步改善患者的生存结果至关重要。

RANKL 受体激活剂（RANKL）及其受体 RANK 属于 TNF 超家族。RANK 信号在骨质疏松症和癌症相关骨骼事件中的重要作用推动了地诺单抗（一种抗 RANKL 的单克隆抗体）的开发，用于治疗与骨质疏松症和癌症相关的骨骼事件（SRE）。乳腺上皮中的 RANK 信号激活可促进肿瘤的发生、发展和转移扩散。因此，RANK 和 RANKL 已成为乳腺癌预防和治疗的有希望的靶点。RANKL 在孕酮受体阳性细胞中表达，并作为乳腺上皮中孕酮的旁分泌介质。RANK 受体表达增高在激素受体阴性肿瘤和高级别乳腺癌中更为常见，但在部分腔内肿瘤中也发现有表达。RANK 信号调控 BRCA1 突变和致癌基因驱动的乳腺肿瘤的增殖和干性。临床前研究显示 RANK 信号抑制可降低 HER2 肿瘤发生。在人类肿瘤中，RANKL 和 HER2 水平比单独的 RANKL 更能预测乳腺癌的骨转移。

曲妥珠单抗和/或拉帕替尼治疗的一些常见（内在或获得性）耐药机制包括 HER2 结合受损、平行/下游通路激活、ER 信号传导、细胞周期失调或逃避抗体依赖性细胞毒性（ADCC）。个性化治疗和更好的预测治疗耐药性的生物标志物将有助于识别可从新的组合疗法中受益的 HER2 阳性乳腺癌患者，为精准医疗铺平道路。

乳腺癌抗药性基因检测中，乳腺癌基因解码基因检测使用 HER2 阳性乳腺癌患者样本和细胞系揭示了 RANK 和 HER2 信号之间的功能关系。通过分析初治患者的 HER2 阳性乳腺癌样本和新辅助抗 HER2 治疗后手术中的残留疾病（包括来自 II 期 SOLTI-1114 PAMELA 试验的配对样本），肿瘤精准用药基因检测观察到抗 HER2 治疗或对抗 HER2 治疗的耐药性都会导致 RANK 表达增加。此外，乳腺癌靶向药物基因检测分析 RANK 调节对 HER2 阳性乳腺癌细胞系中抗 HER2 治疗的影响时，观察到增强的 RANK 信号导致拉帕替尼耐药性增加。

乳腺癌抗药性基因解码基因检测

RANK 和 EGFR 信号之间的串扰已在破骨细胞分化的背景下已经被基因解码，以及在乳腺癌中针对特定的 RANK 截短异构体 的串扰。在乳腺中，乳腺癌如何选择靶向药物的基因检测发现药物抑制 RANKL 可降低 MMTV-ErbB (Neu) 转基因小鼠模型中的肿瘤形成和肺转移。同样，具有杂合 RANK 缺失的 MMTV-ErbB 小鼠显示肺转移比 RANK WT MMTV-ErbB 对照减少。此外，RANKL 治疗增加了 FVB/N 和 MMTV-ErbB 动物的肺转移。最近，一个肿瘤抗药物基因检测报告案例和随后的一篇包含实验数据的文章提出，RANK 和 HER2 信号抑制相结合是治疗 HER2 阳性乳腺癌的新策略。

在乳腺癌的靶向药物选择基因检测中，肿瘤遗传、复发与抗药物行动小组，在 PAMELA 临床试验中的 HER2 阳性肿瘤样本和 HER2 阳性乳腺癌细胞系中，拉帕替尼和曲妥珠单抗双重治疗后RANK基因表达增加。这些观察结果表明，在接受抗 HER2 药物治疗的患者中 RANK 信号传导增强。基因解码基因检测还观察到，与未经治疗的 HER2 阳性乳腺肿瘤相比，在 HER2 耐药的情况下，RANK 肿瘤表达患者的比例翻了一番。此外，与各自的拉帕替尼敏感对照相比，获得性拉帕替尼耐药的 SKBR3 和 BT474 HER2 阳性细胞系均显示出增加的 RANK 表达和通路激活。因此，肿瘤靶向药物基因检测与肿瘤复发监测基因检测对 HER2 阳性乳腺癌样本和细胞系的综合分析表明，HER2 耐药性乳腺癌中的 RANK 表达更高。 RANK 信号缺失使拉帕替尼耐药细胞对药物产生中度敏感性，而 RANK 信号过度激活则增加了 HER2 阳性细胞系（SKBR3、BT474 和 HCC1954）对拉帕替尼的耐药性。基于这些结果，人们可以推测，RANK 信号的激活可能使乳腺癌细胞能够经受住抗 HER2 疗法的治疗，并实现地舒单抗与 HER2 抑制剂联合治疗的益处，正如所假设的那样。

已证明 NF-κB 信号传导可在体外和免疫功能正常的小鼠中增强 ErbB2 诱导的肿瘤生长。RANK 下游 NF-κB 活化增加也可能导致拉帕替尼耐药性。有人提出，NF-κB 信号传导过度活跃是 HER2 阳性和三阴性乳腺癌接受拉帕替尼治疗后产生耐药性的可能机制。在HER2阳性乳腺癌中，拉帕替尼耐药细胞显示 NF-κB 水平升高，并且对单一的 HER2 或 NF-κB 抑制剂没有反应，但对两者的组合有反应 。NF -κB 表达通常与侵袭性高级别肿瘤相关，针对这一点， 可以选择NF - κB 抑制剂。 肿瘤基因解码基因检测的的研究表明，拉帕替尼治疗通过 Src 依赖性 p65 和 IκBα 磷酸化诱导 NF-κB 组成性激活，使细胞对蛋白酶体抑制剂敏感；佳学基因解码的数据表明，作为众所周知的 NF-κB 调节剂，RANK 的增加可能也发挥了作用，尽管肿瘤基因解码现有的证据还不能排除其他 RANK 驱动的下游通路的贡献。IκBα 的磷酸化导致其降解并引起 p50/p65 异二聚体的核易位，这一过程由 IKK 复合物（包括 IKKα、IKKβ 和 IKKγ/NEMO）介导。在 HER2 阳性和 ER 阴性乳腺癌细胞中，HER2 本身已证实通过涉及 IKKα 的经典通路激活 NF-κB。在妊娠期间和 RANKL 刺激后，IKKα 还会介导乳腺细胞中的 NF-κB 活化。在乳腺癌有效治疗的基因检测中，妇科肿瘤的基因检测未观察到用 ErbB 配体刺激后 p65 磷酸化的明显变化，并且拉帕替尼治疗无法抵消 RANKL 治疗在 RANK 过表达的 HER2 阳性细胞系中驱动的 p65 磷酸化，从而为这些细胞提供了另一种生存途径。

重要的是，肿瘤抗药性的负责基因检测检测的鉴定通过共免疫沉淀实验证明了 RANK 与 HER2 结合。因此，肿瘤基因解码基因检测通过邻位连接试验证明了 RANK 与 ErbB 家族成员的相互作用。在该基因解码结果中，作者声称细胞中 RANK/HER2 二聚体的数量与 HER2 表达水平相关。而且，地舒单抗、曲妥珠单抗和/或帕妥珠单抗治疗可减少 RANK/HER2 二聚体的数量，而 RANKL 刺激会导致 RANK/HER2 二聚体的数量增加。最后，基因解码的数据表明，添加 RANKL 会降低 HER2 抑制剂的疗效。佳学基因解码观察收集到的数据表明 RANK 和 HER2 之间的直接相互作用，与 EGF 无关。 RANKL 刺激过度表达 RANK 的 HER2 阳性乳腺癌细胞会降低 HER2 磷酸化，表明 RANKL 影响 ErbB2 信号传导。

肿瘤的发生、发展与精准治疗的基因解码表明，在激活 ERK 和 AKT 通路后，RANKL 可促进乳腺癌细胞迁移。乳腺癌抗药性基因检测项目组还发现，在 SKBR3 和 BT474 细胞系中，RANKL 治疗后 ERK1/2 和 AKT 的磷酸化增加，RANK 水平要么是生理性的，要么是通过受体过表达而增加的。有趣的是，乳腺癌抗药性的产生与应对方案项目组观察到，在 SKBR3 和 BT474 细胞中，拉帕替尼治疗后，RANKL 介导的 ERK1/2 和 AKT 磷酸化诱导被完全消除，同样与 RANK 受体表达水平无关。这些观察结果以及 RANK 与 HER2 相互作用的事实表明，拉帕替尼不仅抑制 EGFR/HER2 酪氨酸磷酸化，还抑制由 RANKL 驱动的 RANK 信号传导（例如，ERK1/2 和 AKT）。重要的是，除了 RANK 和 HER2 之间的直接相互作用外，乳腺癌更好地疗效研发团队还观察到 RANK 信号在功能上与 ErbB2 通路相关。需要进一步研究来确定 RANK/HER2 的直接相互作用是否导致 RANK 信号激活后观察到的对拉帕替尼的耐药性增强。

综上所述，乳腺癌抗药性基因解码基因检测发现抗 HER2 治疗和耐药性获得均提高了 HER2 阳性临床乳腺肿瘤和细胞系中的 RANK 表达水平。此外，增强的 RANK 信号传导增加了 HER2 乳腺癌细胞对拉帕替尼的耐药性。乳腺癌抗药性基因检测发现 RANK 和 HER2 在物理和功能上相互作用。总之，这些结果暗示了针对 RANK 表达的 HER2 阳性乳腺癌患者的双重 RANK 和 HER2 抑制疗法，其益处仍有待检验。

乳腺癌抗药物基因解码对精准医学的贡献

综上所述，乳腺癌抗药性的发生与规避基因检测项目组的研究表明，在 HER2 阳性乳腺癌样本中，特别是那些对抗 HER2 阻断治疗产生耐药性的患者中，RANK 的表达明显增加。这种增加的 RANK 表达与年轻年龄、激素受体阴性状态、以及更高的组织学分级和增殖指数相关。在 PAMELA 试验中，我们观察到使用拉帕替尼和曲妥珠单抗治疗后，RANK 表达显著增加，这一观察在几种 HER2 阳性人乳腺癌细胞系中得到了验证，提示 RANK 信号传导可能在拉帕替尼耐药性的发生中发挥作用。具体而言，RANK 过表达的 HER2 阳性细胞系表现出对拉帕替尼的耐药性增强，并显示出更高水平的 NF-κB 通路活化。此外，我们证实 RANK 在物理和功能上与 HER2 相互作用，这表明存在 RANK/HER2 之间的串扰。因此，抑制 RANK 信号传导可能会改善 RANK 阳性 HER2 阳性乳腺癌患者对抗 HER2 疗法的治疗反应。

乳腺抗药性基因检测的的基因检测位点及检测这些位点对乳腺癌精准治疗的帮助

乳腺癌中的抗药性基因检测在精准治疗中具有重要作用，特别是涉及到 HER2 阳性乳腺癌和 RANK 信号通路的相关性。HER2 阳性乳腺癌通常涉及 HER2 基因的扩增或过表达，对抗 HER2 治疗显示出良好的反应，但一些患者会出现获得性耐药性。研究表明，RANK 信号传导在 HER2 阳性乳腺癌中的表达增加与拉帕替尼耐药性显著相关。因此，检测 HER2 和 RANK 在个体患者中的表达水平，尤其是在治疗后的动态变化，可以帮助预测患者对抗 HER2 疗法的反应和耐药性的发展。

通过检测乳腺癌细胞中 HER2 和 RANK 的表达水平，可以指导是否需要采用单一或联合的抗肿瘤治疗策略。例如，对于表达 HER2 的乳腺癌，监测其 RANK 表达可以帮助决定是否需要加入 RANK 抑制剂或者其他相关的靶向治疗药物，以提高治疗效果并延长耐药性的发展。此外，对 NF-κB 信号通路的检测也可以作为预测抗 HER2 治疗效果和耐药性的一个重要指标。

因此，基因检测位点如 HER2、RANK 和相关的信号通路成分，为个体化乳腺癌治疗提供了重要依据。这些信息不仅可以指导药物选择，还有助于开发新的治疗策略，以应对乳腺癌抗药性的挑战，从而改善患者的治疗效果和生存预后。