【佳学基因检测】基因检测测序技术金标准：Sanger法一代测序

基因测序技术始于1977年，sanger发明的DNA双脱氧末端终止测序法拉开了序幕。Sanger在1958年和1980年因为胰岛素测序和DNA测序而两度获得诺贝尔化学奖，是第四位两度获得诺贝尔奖以及少有获得两次诺贝尔化学奖的人。

图片

Sanger测序

Sanger测序采用四个双脱氧核糖核酸(ddNTP)加入到正在合成的链上，由于双脱氧核糖核酸少了一个氧原子，一旦被加入到DNA链上，反应即终止。

通过构建四个反应体系，加入AGCT四种双脱氧核糖核酸，同时调节脱氧核糖核酸(dNTP)和ddNTP的相对浓度，可以使反应扩增得到几百至上千碱基的终止产物。

随后通过凝胶电泳对产物进行分离，分为四个泳道，每个泳道对应一种碱基，然后读取条带显影结果。

图片

该方法因正确率高，被称为基因检测的金标准，但是耗时长，成本高。

2001年人类基因组计划就是采用sanger测序完成的，从1990年人类基因组计划建立开始，全球的科学家历时11年耗资30亿美元完成。

进入21世纪后，随着物理及化学技术的发展，开始采用相同激发波长但不同发射波长的荧光集团来标记ddNTP，ATGC对应不同的荧光基团产生不同颜色的光被计算机读取，测序的速度和效率大大提高。